Coriell Institute細胞是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。
成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
剛分離的胚肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。
30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。
細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞在合成和分泌細胞因子、維持血管內外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用。
Coriell Institute細胞的實驗方法:
?在細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)貼壁MRC-5細胞,并傳代至9個T25細胞培養(yǎng)瓶內,將配制好的不同pH值細胞培養(yǎng)液,加到T25培養(yǎng)瓶中。
?每天用倒置顯微鏡觀察細胞的生長狀態(tài),包括細胞的形態(tài)、密度、增殖速度等,并拍照記錄,直至細胞長成致密單層為止。
?加入適量的消化液,消化半分鐘后倒掉消化液,加入培養(yǎng)液吹打細胞至分散,制成細胞懸液。
?顯微鏡下觀察不同pH值培養(yǎng)液中的細胞形態(tài),并用細胞計數(shù)儀對細胞數(shù)量進行計數(shù)。
CoriellInstitute細胞處理方法:
1.棄去培養(yǎng)液,加少量消化液潤洗一次。
2.棄去液體,再加入適量的消化液,細胞瓶可加入消化液。
3.置室溫或37℃放置至細胞變圓或細胞分散為單個細胞,不要搖動以免細胞成團。
4.加入新鮮培養(yǎng)液,吹打混勻并加置新瓶中。